Argument

Acte I

Scène 1 : dans la propriété de Kotchoubeï au bord du Dniepr. Des jeunes paysannes chantent et lancent dans la rivière des guirlandes de fleurs pour connaître l'avenir de leurs amours. Maria arrive mais ne peut rester avec elles : Mazeppa, hetman d'Ukraine, qui a l'âge de son père, vient d'arriver à la maison et elle en est amoureuse. Andreï,son ami d'enfance, surgit et lui avoue en vain son amour. 

Les parents de Maria arrivent avec leurs invités, dont Mazeppa qui remercie Kotchoubeï pour son hospitalité. Des danses sont organisées dont un Gopak. Mazeppa prend Kotchoubeï à part et lui demande la main de Maria, Kotchoubeï objecte que Mazeppa est le parrain de Maria. Celui-ci réplique que l'église fera une exception et que Maria a donné son accord. Kotchubeï continue à refuser et Mazeppa appelle ses gardes. Avant que la bataille se déclenche, Maria s'interpose. Mazeppa lui demande de choisir, et elle décide de le suivre à la consternation du clan de Kotchoubeï. Mazeppa part avec Maria et sa troupe en proférant des menaces.

Scène 2 : Dans une pièce de la demeure de Kotchoubeï. Lioubov, la mère de Maria, veut se venger de l'insulte faite par Mazeppa. Kotchoubeï décide de dénoncer au tsar, Pierre le Grand, le complot que Mazeppa organise avec les Suédois. Andreï se porte volontaire pour aller voir le tsar.

Acte II

Scène 1 : dans le donjon du château de Mazeppa. Kotchoubeï est enchaîné : le tsar qui fait confiance à Mazeppa lui a livré ses accusateurs. Orlik veut par la torture obtenir de Kotchoubeï l'endroit où il a caché son trésor.

Scène 2 : sur une terrasse du château de Mazeppa, la nuit. Mazeppa est seul et doit tuer Kotboucheï pour assurer son pouvoir, mais il s'inquiète de la réaction de Maria quand elle apprendra la vérité. Orlik annonce qu'il n'a pas réussi à faire parler Kotchubeï. Mazeppa ordonne qu'on l'exécute. Maria rejoint Mazeppa et lui reproche son éloignement. Celui-ci se défend et lui confie son projet de faire de l'Ukraine un pays indépendant sur lequel il règnerait. Il fait dire à Maria qu'elle sacrifiera tout pour lui. Restée seule, Maria pense à ses parents ; sa mère surgit et lui apprend ce qui est arrivé à son père. Elles se précipitent pour essayer de le sauver.

Scène 3 : une place près de l'échafaud. Le peuple attend l'arrivée des condamnés. Un cosaque ivre chante une chanson qui choque les spectateurs. Mazeppa arrive à cheval. Kotchoubeï et Iskra sont emmenés enchaînés. Kotchoubeï fait sa dernière prière et les haches des bourreaux tombent. Maria et Lioubov arrivent trop tard.

Acte III

L'acte commence par une musique qui évoque la bataille de Poltava remportée par les Russes sur les Suédois alliés avec Mazeppa. Le rideau s'ouvre sur les ruines de la propriété de Kotchoubeï. Andreï se reproche de ne pas avoir pu tuer Mazeppa dans la bataille, puis il se cache quand Mazeppa et Orlik en fuite arrivent. Andreï reconnaît Mazeppa et le provoque en duel, mais Mazeppa tire et le blesse mortellement. Devenue folle, Maria arrive. Orlik empêche Mazeppa de l'emmener avec eux. Ils s'enfuient. Maria remarque le corps d'Andreï. Elle lui chante doucement leur enfance heureuse et il meurt dans ses bras.